使用純水沖洗離子色譜柱正確嗎?
離子色譜柱使用純水進(jìn)行沖洗是錯誤的。因為在一般情況下,如果直接使用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,很容易導致離子色譜柱中的固定相流失并且出現相塌陷現象,因此一般情況下并不建議直接使用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗的。
通常我們在對離子色譜柱進(jìn)行沖洗時(shí),是建議在純水中加入甲醇或乙腈等物質(zhì),再對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,這樣的對離子色譜柱進(jìn)行沖洗一般不會(huì )對離子色譜柱造成影響。而離子色譜柱之所以不能直接用純水進(jìn)行沖洗的原因分析有以下幾點(diǎn):
1.一般離子色譜柱的材質(zhì)不允許長(cháng)時(shí)間被純水沖洗。由于現今大部分離子色譜柱以硅膠為基質(zhì),而硅膠的性質(zhì)卻是其溶解度在純水中會(huì )比一般含有有機溶劑中要大得多,因而使用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,會(huì )讓離子色譜柱中的硅膠材質(zhì)產(chǎn)生溶解,長(cháng)時(shí)間的純水沖洗會(huì )導致離子色譜柱中的固定相流失,從而降低了離子色譜柱的柱效。
2.對一般C18柱來(lái)說(shuō),因為C18長(cháng)鏈本身是溶解在水中的,而且C18長(cháng)鏈之間的相互作用力是大于C18和水分子之間的作用力的,所以如果長(cháng)時(shí)間的用純水對離子色譜柱進(jìn)行沖洗,會(huì )讓C18長(cháng)鏈之間相互靠近,并且使得相互聯(lián)結的C18長(cháng)鏈在硅膠質(zhì)地的基質(zhì)表面上倒伏,對疏水性物質(zhì)的保留能力會(huì )因此下降,即相塌陷。
為了給只能溶解在純水中的樣品提供分析條件,有些企業(yè)推出適合做離子色譜柱沖洗的純水柱,這種純水柱不會(huì )產(chǎn)生相塌陷,因而可以對只溶解在純水中的樣品進(jìn)行分析了。
3.如果離子色譜柱中使用過(guò)含緩沖鹽的流動(dòng)相時(shí),用純水沖洗并不能將緩沖鹽洗去。這是因為緩沖鹽本身是難溶于有機溶劑中的,C18反相柱中用到的填料是在硅膠表面上接上的C18長(cháng)鏈,這相當于一個(gè)疏水的有機相,并且因為硅膠基體被有機物質(zhì)包裹著(zhù),所以在操作時(shí)使用緩沖鹽水溶液做流動(dòng)相時(shí)緩沖鹽可能不容易到達硅膠基質(zhì),不至損害基體。但是使用的流動(dòng)相一般來(lái)說(shuō)通常會(huì )有一些有機溶劑,而且這些有機溶劑和C18長(cháng)鏈是互相溶解的,因此有機溶劑的加入增強了流動(dòng)相滲入硅膠基質(zhì)的能力,能讓一部分的緩沖鹽與硅膠基質(zhì)接觸。
所以直接用純水沖洗離子色譜柱只能沖洗其表面的緩沖鹽,但是滲入到離子色譜柱中深處的緩沖鹽仍舊會(huì )殘留在那里。所以建議在沖洗離子色譜柱的時(shí)候,在純水中加入一部分有機溶劑,水和有機溶劑的比例視情況而定,這樣含有有機溶劑的水便能對離子色譜柱進(jìn)行沖洗了。
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