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新冠病毒研究用水:二氧化碳培養箱用水要求

文章出處:網(wǎng)絡(luò ) 人氣:發(fā)表時(shí)間:2021-11-03

新冠病毒的研究會(huì )用到實(shí)驗室常見(jiàn)的儀器——二氧化碳培養箱,通過(guò)模擬類(lèi)似細胞/組織在生物體內的生長(cháng)環(huán)境,來(lái)對細胞/組織進(jìn)行體外培養,廣泛應用于醫學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、微生物、農業(yè)科學(xué)、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn)。

根據工作原理二氧化碳培養箱可分為水套式和氣套式兩種。水套式二氧化碳培養箱需要加水,通過(guò)水的熱量傳遞保持溫度的恒定和維持足夠的濕度水平。一般培養箱會(huì )在加熱的控制面板上安裝一個(gè)蓄水池,需要定期加入超,維持箱內的濕度,避免培養液蒸發(fā)。

培養箱為什么需要加呢?

1、降低水中離子的影響

在細胞培養中,一些重金屬離子的含量要求控制在細胞所需的生理范圍內,如:銅離子濃度過(guò)低,會(huì )影響相關(guān)酶的活性及相應的生理代謝途徑,進(jìn)而影響細胞的正常生長(cháng);銅離子濃度過(guò)高時(shí),促進(jìn)自由基形成,同時(shí)能氧化蛋白、脂類(lèi)和 DNA,造成細胞膜電位的下降進(jìn)而引起細胞的死亡;鈣、鎂等金屬離子會(huì )降低胰酶活力,達不到消化的效果。

通常,電阻率儀能檢測到的18.2 MΩ·cm的超純水中離子雜質(zhì)的總含量小于1ppb(250C),已有效去除了水中的金屬離子。

牛血清和培養基中的離子濃度已滿(mǎn)足細胞生長(cháng)的需要,在細胞培養試劑的配制和細胞培養箱用水,為避免干擾,應該選用超純水,尤其是在配置消化液時(shí)需要使用低鈣鎂型的超純水。使用超純水,不僅可有效防止礦物質(zhì)儲積在水箱內產(chǎn)生腐蝕作用,也會(huì )降低水中的金屬元素對細胞生長(cháng)的影響。

2、避免微生物的引入

細胞培養箱污染是導致細胞培養失敗的一個(gè)主要因素,會(huì )殃及整個(gè)實(shí)驗室的細胞培養實(shí)驗。二氧化碳培養箱中的主要污染源:細菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原體、非同種細胞等。另外,內毒素污染也會(huì )給細胞培養實(shí)驗帶來(lái)諸多難以預料的不良后果,如,改變細胞形態(tài),影響細胞附著(zhù)力,活化細胞產(chǎn)生細胞因子等,極大程度影響后續實(shí)驗進(jìn)程和結果的準確性。

通常細胞培養的內毒素污染來(lái)自于血清、培養液及外加藥物配制用水等。為避免細胞培養受到內毒素污染的影響,選擇無(wú)內毒素的超純水進(jìn)行細胞培養相關(guān)試劑的配制和細胞培養箱供水是很關(guān)鍵的一步。

可有效去除水中的熱原(內毒素)、核酸酶、細菌等雜質(zhì),是防止外源微生物污染箱內環(huán)境的一個(gè)有效屏障。

3、減少有機物的影響

水中的有機雜質(zhì)通常是生物源、植物材料腐爛產(chǎn)生的腐殖酸,這些溶解在水中的有機物會(huì )促進(jìn)微生物的繁殖,阻礙細胞的生長(cháng)。細胞培養的有機物含量要求TOC<5ppb。

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